簡(jiǎn)要描述:IOSE-80 人正常卵巢上皮細胞系(Human Normal Ovarian Epithelial Cells)凍存條件:LeapWal 無(wú)血清細胞凍存液(貨號:PZ110R),替代方案:完*培養液或 FBS+ 10% DMSO
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IOSE-80 人正常卵巢上皮細胞系
(Human Normal Ovarian Epithelial Cells)
IOSE-80 人正常卵巢上皮細胞系
細胞凍存
?。?)細胞生長(cháng)狀態(tài)良好,細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行細胞凍存。首先,棄去培養上清,用PBS潤洗細胞1-2次。
?。?)加1-2ml消化液(0.25%Trypsin)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加與消化液等體積的含10%血清的完*培養基終止消化。
?。?)輕輕吹打細胞,待細胞完*脫落后吸出,1000rpm離心5分鐘。
?。?)棄去上清液,往細胞沉淀中加入1ml/支的立譜沃無(wú)血清凍存液(貨號:PZ110R),混勻后加入凍存管中。(例如:凍存2支細胞,加入2mL無(wú)血清凍存液)
?。?)將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可(如果追求更理想的細胞復蘇率,也可選擇使用程序降溫盒),如后期要將細胞轉入液氮罐中,需在-80℃冰箱存放24小時(shí)以上。