慢病毒濃縮試劑包括多個(gè)存儲模組，存儲模組包括固定座、設于固定座上的存放槽、設于存放槽底部的支撐臺、設于存放槽上側的位環(huán)；試劑管放置于存放槽內；提高了試劑管在存儲以及運輸過(guò)程中的穩定性。通常用于實(shí)驗室、產(chǎn)品研發(fā)部等地方，而有時(shí)在將攜帶有慢病毒的試劑管存儲在純化試劑盒內后，需要將試劑盒運輸至特定的區域內，在存儲、運輸的過(guò)程中，目前的試劑盒容易出現試劑管傾倒或與試劑盒內部產(chǎn)生碰撞的情況，進(jìn)而導致試劑管破裂，使得試劑管內部的慢病毒溢出，進(jìn)而造成嚴重的污染，不利于試劑管的運輸以及存儲。
 

　　慢病毒濃縮試劑使用說(shuō)明：
 

　　1.收集慢病毒上清液，0.45um濾膜過(guò)濾，以除去細胞和碎片。
 

　　Note：如果使用濾膜過(guò)濾，只能使用低蛋白結合力的纖維素醋酸酯或聚醚堿(PES)膜。不能用硝酸纖維素膜(NC)。
 

　　2.將慢病毒上清與試劑盒中的濃縮液按照4：1的比例混合(上清液4份，濃縮液1份)，4C孵育2h或過(guò)夜。剛開(kāi)始時(shí)每隔30min混勻一下，進(jìn)行3次。
 

　　Note：若時(shí)間不寬裕，可將孵育時(shí)間縮短為幾小時(shí)。慢病毒顆粒在4C可以穩定保存數天。
 

　　3.于4℃，水平轉子4000g離心25min。
 

　　Note：角轉子會(huì )將病毒離心到管壁上，仔細分辨管壁上的白色沉淀并將其沖洗下來(lái)。
 

　　4.小心去除上清，不要晃動(dòng)管子，一般可見(jiàn)白色沉淀(有時(shí)沉淀不可見(jiàn))。
 

　　5.用初始體積(原上清液體積)1/10-1/100的DMEM或PBS重懸病毒顆粒，小心吹打均勻，重懸沉淀物。
 

　　6.測定濃縮慢病毒樣品的滴度，50uL/管分裝，于-80C冰箱保存。
 

　　Note：慢病毒凍存液避免反復凍融，否則會(huì )降低病毒滴度。